斯嘉麗8歲開始就從事專業表演，9歲開始拍電視，10歲演電影。而她對演戲的興趣，3歲時就顯露了出來。長大后斯嘉麗進入了一家專門培養年輕演員的演藝學校學習，畢業后很快就登上小劇場舞臺。她的舞臺處女作的搭檔是伊桑·霍克。

　　1994年，斯嘉麗出演了她第一部影片《北》。她在片中扮演了一個小角色，隨后又演了兩部名氣不大的影片《合適的理由》和《如果露西倒掉》。

　　1996年，斯嘉麗在影片《曼尼和羅》中扮演了一個失去雙親的小女孩，獲得了當年的“獨立精神獎”最佳女演員提名。1997年，不滿13歲的約翰遜在《曼妮姐妹》（Manny & Lo）中扮演了一個失去雙親的小女孩，她的表演大獲好評，并獲得美國獨立精神獎最佳女主角提名。1998年，她得到大導演羅伯特-雷德福的青睞，請她在其新片《馬語者》中扮演女主角克麗思汀-司科特-托馬斯的女兒——一個失去一條腿的女孩。盡管這部影片毀譽參半，斯嘉麗的表演卻受到廣泛的好評，獲得“票房炸彈獎”最佳女配角提名和多項“希望之星”頭銜。

　　2000年，斯嘉麗接連出演了《幽靈世界》、《美國狂想曲》等影片，大多是獨立制片的作品。

　　2001年被柯恩兄弟選中出演《缺席的人》的“琴聲少女”貝蒂 ?。

　　2002年，她出演了一步科幻恐怖片《八腳怪》。年，她主演了女導演索非亞·科波拉的影片《迷失東京》，并獲得廣泛好評。2004年，她又主演了《戴珍珠耳環的女孩》 ?。這兩部影片讓她同時入圍金球獎的劇情片和喜劇片最佳女主角。 ?

　　2007年，斯嘉麗主演的《保姆日記》上映。在影片中，斯嘉麗飾演一個在紐約念兒童教育的大學生，為曼哈頓一家有錢人家當4歲男孩保姆的故事 ?。

　　2008年，斯嘉麗發表了向搖滾大師湯姆·威茲致敬的首張專輯《Anywhere I Lay My Head》 ?。同年她還出演了影片《閃靈俠》 ?。8月4日，斯嘉麗出席了《午夜巴塞羅那》舉行的洛杉磯首映禮。影片由伍迪·艾倫執導，斯嘉麗·約翰遜、哈維爾·巴登和佩內洛普·克魯茲主演 ?。

　　2009年2月，斯嘉麗出席了愛情文藝片《其實你不懂他的心》在洛杉磯舉行的首映式 ?。斯嘉麗還與列維·施瑞博爾合作主演了阿瑟·米勒的劇作《橋上一瞥》。憑借劇作中的演繹，斯嘉麗獲得了第64屆托尼獎戲劇類最佳女配角獎 ?。9月，她與另類搖滾歌手皮特·約恩合作，共同錄制了一張名為《Break Up》的專輯 ?。

　　2010年，斯嘉麗出演的《鋼鐵俠2》上映，影片在北美票房突破3億美元 ?。

　　2011年，斯嘉麗出演了《復仇者聯盟》，并因此與其他主演一同獲得了第22屆MTV電影獎最佳打斗 ?。

　　2012年，她出演了《希區柯克》 ?。1月25日，互聯網電影數據庫Pro的十周年紀念日之際，公布了在過去十年里IMDB搜索排名前十的演員，斯嘉麗排行第七 ?。2月4日，她憑借在《我家買了動物園》中的表演而被授予金攝影機獎“最佳國際女演員”獎 ?。4月，她出席了《復仇者聯盟》在好萊塢El Capitan劇院舉行的首映禮 ?。5月，斯嘉麗留名好萊塢星光大道 ?。7月22日，11月，她登上《V》雜志封面 ?。

　　2013年，斯嘉麗出演了《美國隊長：冬日戰士》 ?。6月，斯嘉麗登上法國版《名利場》雜志的7月刊將封面 ?。9月，斯嘉麗·約翰遜主演的《皮囊之下》在威尼斯舉行了首映儀式 ?，她主演的《情圣囧色夫》在多倫多電影節舉行了首映禮 ?。10月，斯嘉麗登上Esquire十一月刊的封面，同時也獲頒該雜志評選出的年度最性感女人頭銜 ?。11月，斯嘉麗憑借《皮囊之下》獲得第16屆英國獨立電影獎最佳女演員的提名 ?，并憑借《她》獲得羅馬電影節的最佳女主角，成為羅馬電影節上首位憑借聲音獲獎的最佳女主角 ?。12月18日，影片《她》在美國公映，斯嘉麗在片中用聲音扮演了人工智能軟件“莎曼珊”，與華金·菲尼克斯飾演的男主角演繹了一段“觸不到的戀情” ?。12月，斯嘉麗憑借在《她》中的演出獲得了底特律影評人協會獎最佳女配角 ?。

　　2014年2月28日，第39屆法國電影凱撒獎頒獎典禮在巴黎夏特萊劇場舉行，斯嘉麗·約翰遜獲頒法國電影凱撒獎榮譽獎 ?。在《美國隊長2》于中國國內上映之際，斯嘉麗·約翰遜第一次來到了中國 ?。3月24日，斯嘉麗與克里斯·埃文斯、塞繆爾·杰克遜一同出席了《美國隊長2》在北京舉行的見面會 ?。4月，斯嘉麗加盟改編自同名故事集的《森林王子》 ?。此外，她還為安迪·瑟金斯執導的《叢林之書：起源》配音 ?。7月25日，斯嘉麗·約翰遜擔綱女主角的科幻動作影片《超體》在北美上映，以4402萬美金的成績問鼎該周票房冠軍 ?，獲得4.6億美元的全球票房，超越了安吉麗娜·朱莉保持多年的紀錄 ?。

　　2015年4月12日，第24屆MTV電影獎在洛杉磯揭曉，斯嘉麗·約翰遜作為頒獎嘉賓亮相 ?。5月1日，主演的電影《復仇者聯盟2：奧創紀元》在北美上映 ?。

　　2016年4月15日，迪士尼出品的真人冒險動畫片《奇幻森林》上映，斯嘉麗·約翰遜為片中的巨蟒配音 ?。4月末，確定出演電影《美麗與詛咒》的女主角 ?。5月6日，《美國隊長3》在中國與美國同步上映，斯嘉麗·約翰遜在片中再度飾演“黑寡婦”一角。